9L/lacZ大鼠膠質肉瘤細胞
細胞基本屬性:
產品名稱 | 9L/lacZ大鼠膠質肉瘤細胞(種屬鑒定正確) | 年齡性別 | 雄性 |
種屬 | 大鼠 | 組織來源 | 腦,膠質細胞 |
細胞形態 | 成纖維細胞樣 | 生長特性 | 貼壁生長 |
凍存條件 | 無血清凍存液,液氮儲存 |
細胞詳細介紹:
細胞別稱 9L/lacZ;大鼠膠質肉瘤細胞 背景簡介;9L/lacZ細胞株1989年從9L細胞株(大鼠誘導的膠質瘤細胞株)發展而來。 用攜帶E. coli編碼beta-半乳糖苷酶lacZ基因和帶來G418抗性的Tn5基因BAG復制缺陷的逆轉錄病毒載體感染9L細胞株。 細胞在G418存在下培養14天,克隆,并檢測beta-半乳糖苷酶生成。 9L/lacZ產生高水平的酶,選擇其進行后續研究。 細胞持續表達lacZ報告基因產物,從E. coli衍生來的beta-半乳糖苷酶,從而可以通過組織切片的組織化學染色來鑒定單個腫瘤細胞。 同一片子上的淋巴細胞和其它響應細胞也可以通過雙標記抗體進行鑒定。 染色細胞和背景的對比有益于圖像分析。 這是少數允許量化分析的大腦微觀腫瘤模型中的一種。 這種腫瘤模仿了人類大腦腫瘤的生長和傳播的重要特性。 beta-半乳糖苷酶的表達十分穩定,但細胞培養數月后應該重新進行克隆。 細胞代數;10代以內 細胞規格;1×106cells/T25培養瓶或者1mL凍存管包裝 支原體檢測;無 保藏機構;ATCC; CRL-2200 培養基;90%DMEM+10%FBS+PS 培養條件;氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃ 凍存條件無血清凍存液,液氮儲 發貨方式復蘇發貨(免運輸費用)/ 凍存發貨(需加干冰運輸費用) 順豐快遞 供應限制僅限于科學研究,絕不可作為動物或人類疾病的治療產品使用 特別說明以下細胞培養凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產品說明書為主 |
二、懸浮細胞
傳代培養操作步驟如下:
一般實驗室中懸浮細胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法(培養液中含有細胞碎片的情況下)。當在顯微鏡下觀察到懸浮細胞已經長滿至80%~90%(細胞懸液變黃)時,即可進行傳代。
(1)嚴格進行無菌操作,所用一切試劑及耗材均應無菌,且須在無菌超凈工作臺中紫外照射30min以上,以免細胞發生污染。
(2)所用培養液必須適宜細胞生存和生長。來源于不同動物種類、組織類型的細胞,對培養液的要求不一樣,必要時可用預實驗的方法選擇適當的培養液。
(3)胎牛血清對于維持細胞生存,促進細胞生長起著關鍵作用??筛鶕墨I或預實驗選擇合適的胎牛血清。一旦確定,就應保持用至實驗完成。
(4)消化細胞時應避免消化時間過短導致消化不收集到的細胞數量少,或消化時間過長導致細胞成團塊樣絮狀游離,這時的細胞已有損傷或死亡,影響細胞數量和實驗進度。
(5)細胞離心的時候應避免離心力過小收集的細胞數量不夠,或離心力過大對細胞產生損傷。離心后的細胞沉淀棄去上清后,應先彈散細胞沉淀,再加入培養液重懸,這樣比直接吹打對細胞損傷小,可以提高細胞活率。
(6)吹打細胞時應盡量避免細胞的產生,以免損傷細胞,影響細胞狀態(吹打過程中殘留部分液體在吸頭內可以減少氣泡的產生)。
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三磷酸腺苷結合盒轉運蛋白4抗體
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線粒體蘋果酸脫氫酶2抗體
伴侶蛋白bc1同源復合體抗體
磷酸化雌激素受體α抗體
CWC22蛋白抗體
9L/lacZ大鼠膠質肉瘤細胞氧化應激反應蛋白1抗體
傳代培養操作步驟:
一、貼壁培養
細胞傳代培養操作步驟如下:
(1)傳代前在倒置顯微鏡下觀察細胞形態和生長密度,當細胞生長密度達到80%~90%時,即可進行傳代。
(2)吸掉或倒掉培養瓶內的培養液。加入PBS清洗1~2次,左右輕輕搖晃后棄掉。
(3)根據培養瓶大小向瓶內加入適量含EDTA的,一般應覆蓋整個培養瓶底。
(4)把培養瓶放入37℃ CO2培養箱進行消化,2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進行觀察,當發現有70%~80%細胞收縮變圓、細胞間隙變大時,再輕輕拍打培養瓶使剩余細胞脫落,然后立即加入2倍量的培養液中止消化,使用吸頭輕輕吹打,混合均勻,以防消化過度。
(5)吸出所有細胞懸液至離心管內,1000rpm/min離心3~5min。
(6)棄上清,加入適量培養液重懸細胞,輕輕吹打混勻,使細胞均勻分散。
(7)用吸頭吸取適量細胞懸液,以適宜的密度接種于新的培養瓶中,補足培養液,搖勻,放置于37℃ CO2培養箱中進行培養。
(8)根據細胞生長狀態確定換液或傳代時間,甚至進行細胞凍存。
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