型 號
產品時間2024-12-13
所屬分類細胞因子及蛋白 /細胞因子
報價3200
商品屬性:
產品名稱 | 重組人神經生長因子-β(β-NGF) | 英文名稱 | Human β-NGF protein |
規(guī)格 | 20 μg/100 μg/500 μg/1 mg | 貨號 | EY-01X8683 |
運輸條件 | 藍冰運輸 | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
背景:
神經生長因子(NGF)對交感神經和感覺神經元系統(tǒng)的發(fā)育和維持至關重要。NGF 已被證實是一種復合物,由名為 α、β 和 γ 亞基的三種多肽組成。其中,β亞基,即β-NGF,是一種 26.9 kDa 的蛋白質,含有 241 個殘基,參與神經元的存活和分化。此外,β-NGF 還是 TRKA 受體的配體,而 TRKA 受體是痛覺和溫覺神經元分化和發(fā)育所的。
標記:
1.將細胞培養(yǎng)基與EdU溶液按照500:1的比例混合,制成2×EdU標記培養(yǎng)基。
2.提前將2×EdU標記培養(yǎng)基預熱,然后將150微升2×EdU標記培養(yǎng)基與等體積細胞培養(yǎng)基混合,獲得1×EdU溶液。
【注】:①不建議替換全部培養(yǎng)基,這樣可能會影響細胞增殖的速度。②配置好的培養(yǎng)基建議現(xiàn)用現(xiàn)配,用量以沒過細胞為宜。
3.孵育細胞2 h,棄培養(yǎng)基。
【注】:①培養(yǎng)時間取決于細胞的增殖速度和生長狀態(tài)。②大多數(shù)腫瘤細胞以及粘附細胞系均可采用2 h的孵育時間。
4.以1xPBS清洗細胞兩次,每次5 min, 以除去未摻入DNA的EdU殘留。
【注】:對于貼壁不牢的細胞可降低清洗強度。
實驗步驟:
1. 將細胞以 104-105 個細胞/孔的密度接種在 96 孔板 中,加入 100μL 培養(yǎng)基,含或不含待測化合物。在 CO2 培養(yǎng)箱中在 37℃ 下培養(yǎng)細胞 24 小時。
2. 向板中加入 10μL 不同濃度的待測物質。
3. 在培養(yǎng)箱中將培養(yǎng)板培養(yǎng)適當時間(如 6、12、24 或 48 小時)。
4. 向板的每個孔中加入 10μL CCK-8 溶液。小心不要將氣泡引入孔中。
5. 將平板在培養(yǎng)箱中孵育 1-4 小時。
6. 在讀板之前,在定軌振蕩器上輕輕混勻。
7. 使用酶標儀測量 450nm 處的吸光度。
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